著者:
Tamara Smith
作成日:
22 1月 2021
更新日:
1 J 2024
コンテンツ
ピペットは、非常に少量の液体を測定および移送するために使用される実験装置の一種です。ピペット測定の精度と精度が必要です。これは、供給量の偏差が実験の結果に影響を与える可能性があるためです。精度を確保するために、数ヶ月ごとにピペットのキャリブレーションをチェックする必要があります。キャリブレーションプロセスは、機器が正しいボリュームをディスペンスしていることを確認するのに役立ち、そうでない場合でも復元できます。
ステップに
パート1/2：キャリブレーションの確認
必要な資料を集めてください。 ピペットの校正を確認するには、ピペット、ピペットチップ、蒸留水、ビーカー、温度計、天びん、皿が必要です。天びんは、最大1 µlのマイクロピペットを校正するためにマイクログラム固有である必要があります。 - 5ml以上の水は必要ありません。カップに水を入れます。
- ピペットチップが適切にフィットすることを確認してください。
蒸留水の温度を測定します。 温度計を水中に置き、少なくとも1分間そのままにします。温度計の赤い線がまだ動いている場合は、もう1分間そのままにしておきます。 1分後、ノートに温度を書き留めます。温度計を取り外し、終わったら乾かします。 - 水の温度は、キャリブレーションをチェックするために行われる計算にとって重要です。
天びんに目盛りを置き、ゼロに設定します。 理想的には、ドアと断熱された部屋のある天びんを使用します。ボウルを部屋に置き、ドアを閉めます。ドアがない場合は、天びんにボウルを置くだけです。 「ゼロ」または「風袋引き」ボタンを押して、天びんがゼロになるのを待ちます。 - 天びんをゼロに設定することで、プラスチック製のボウルの重量を考慮せず、ボウルに入れたものの重量のみを測定することが可能になります。
キャリブレーション用のピペットを準備します。 開始する前に、ピペットをエタノールで拭いて汚染物質を殺します。さらに、ピペットの先端が詰まらないようにします。正しい先端を端に置き、テストする音量を設定します。 - キャリブレーションの前に、ピペットが分注できる最小容量と最大容量の両方をテストします。
校正する前にチップを洗い流してください。 ボタンを最初のストップに押し込み、チップを蒸留水に挿入して、約2mmが液体に沈むようにします。ボタンを放して液体を吸い上げ、ボタンを押し下げて液体を再度分注します。これを3回繰り返して、チップを洗い流します。 - ボタンを2番目のストップまで押して、チップに残っている液体を分注し、ピペットを水から取り出します。
キャリブレーションボリュームを作成します。 チップを液体から取り出した状態で、ボタンを最初のストップまで押し下げます。先端から約2mmを蒸留水に入れ、ボタンを離して液体を先端に引き込みます。チップを水から取り除く前に、約1秒待ちます。 - 吸引プロセス全体を通して、チップが完全に水没していることを確認してください。先端に泡が入らないようにすると、結果が正しくなくなります。
天びんのボウルに液体を入れます。 ボウルの底にチップを置き、ボタンを最初のストップまで押し下げます。水から少し離れた別の場所に移動し、ボタンを2番目のストップまで押します。ボタンを押したまま、ボウルの先端を持ち上げます。 - チップをピペットに付けたままにします。これは、さらにキャリブレーションテストを行うために再び使用するためです。先端が何にも触れていないことを確認してください。
バランスを示す重量を記録します。 隔離された部屋で天びんを使用している場合は、ドアを閉めてください。値の変更が停止するのを待ちます。この値をノートブックに記録します。 - 数字が安定するのを待ってから書き留めておくことが重要です。あなたが待たなければあなたの読みは間違っているでしょう。
少なくとも10回の測定が完了するまで、このプロセスを繰り返します。 天びんをゼロに設定し、チップを洗い流し、同じ容量を引き出し、容量を分注してから、重量を記録します。同じ音量の複数の録音が必要な場合は、すべての録音の平均をまとめることができます。 - ボリュームごとに複数の測定を行う限り、異なるボリュームでこの同じプロセスを繰り返すことができます。
パート2/2：結果の計算
計算されたボリュームの式を使用します。 ピペットによって供給される量を計算する式は、V = w * Zです。ここで、wは水の重量、Zは水の密度に基づく換算係数、Vは計算された水の量の量です。が渡されます。 - 実験の開始時に記録された温度を使用して水の密度を調べることにより、Z変数を見つけることができます。
- 例：水の温度が23°Cの場合、Z値は1.0035 µg / mgと想定します。
繰り返された試行の平均を計算します。 ピペットによってディスペンスされた水の量を少なくとも10回計量している必要があります。これらすべての値の平均を計算するには、それらを合計して10で割ります。試行回数が多かれ少なかれ行われた場合は、各試行を加算し、合計を試行の総数で除算します。 - 例：10µlピペットボリュームに登録した10個の分銅は、9.89、10.01、10.02、9.99、9.95、10.04、9.96、10.01、9.99、および9.98です。
- 平均は次のとおりです：（9.89 + 10.01 + 10.02 + 9.99 + 9.95+ 10.04 + 9.96 + 10.01 + 9.99 + 9.98）/ 10 = 99、84 / 10 = 9.984
変数を方程式に適用して解きます。 各変数の正しい値を決定したら、それらを方程式に組み込んで、計算された体積を解くことができます。これを解決するには、すべてのテスト値の平均重みにZ値を掛けるだけです。 - 例：V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
ピペットの精度を計算します。 精度を計算するには、式A = 100 xVを使用できます。平均/ V0 ここで、Aはピペットの精度Vです。平均 計算された平均体積、およびV。0 ピペットに設定した値。精度は99〜101％でなければなりません。 - ピペットが適切にキャリブレーションされている場合、計算値はピペットに設定した実際の値に非常に近いはずです。
- 例：A = 100 x V平均/ V0 = 100 x 10.019 / 10 = 100 x 1.0019 = 100.19％
- このピペットは適切に校正されています。
必要に応じて、キャリブレーションのためにピペットを送ります。 ピペットがキャリブレーションテストに失敗した場合は、すぐに実験への使用を中止してください。ピペットは、実験装置の非常に繊細で高価な部品です。キャリブレーションを自分で修復することはできないため、適切なメンテナンスのためにキャリブレーションを送付する必要があります。あるいは、いくつかの会社があなたの研究室に来て、そこであなたのピペットを校正します。 - メンテナンスについては、特定のピペットブランドを製造している会社にお問い合わせください。
